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發(fā)布日期:2022-10-09 點(diǎn)擊率:87
分光光度計(jì)是測(cè)量?jī)x器,通過(guò)分光光度計(jì),我們能夠?qū)膺M(jìn)行分解。為了增進(jìn)大家對(duì)分光光度計(jì)的認(rèn)識(shí),本文基于兩點(diǎn)介紹分光光度計(jì):1.分光光度計(jì)的光譜范圍、2.紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的使用。如果你對(duì)分光光度計(jì)具有興趣,不妨繼續(xù)往下閱讀哦。
一、分光光度計(jì)光譜范圍
分光光度計(jì),又稱光譜儀(spectrometer),是將成分復(fù)雜的光,分解為光譜線的科學(xué)儀器。測(cè)量范圍一般包括波長(zhǎng)范圍為380~780 nm的可見(jiàn)光區(qū)和波長(zhǎng)范圍為200~380 nm的紫外光區(qū)。不同的光源都有其特有的發(fā)射光譜,因此可采用不同的發(fā)光體作為儀器的光源。鎢燈的發(fā)射光譜:鎢燈光源所發(fā)出的380~780nm波長(zhǎng)的光譜光通過(guò)三棱鏡折射后,可得到由紅、橙、黃、綠、藍(lán)、靛、紫組成的連續(xù)色譜;該色譜可作為可見(jiàn)光分光光度計(jì)的光源。
包括波長(zhǎng)范圍為400~760 nm的可見(jiàn)光區(qū)和波長(zhǎng)范圍為200~400 nm的紫外光區(qū)。不同的光源都有其特有的發(fā)射光譜,因此可采用不同的發(fā)光體作為儀器的光源。
鎢燈的發(fā)射光譜:鎢燈光源所發(fā)出的400~760nm波長(zhǎng)的光譜光通過(guò)三棱鏡折射后,可得到由紅橙,黃綠,藍(lán)靛,紫組成的連續(xù)色譜;該色譜可作為可見(jiàn)光分光光度計(jì)的光源。
氫燈(或氘燈)的發(fā)射光譜:氫燈能發(fā)出185~400 nm波長(zhǎng)的光譜可作為紫外光光度計(jì)的光源。
物質(zhì)的吸收光譜:
如果在光源和棱鏡之間放上某種物質(zhì)的溶液,此時(shí)在屏上所顯示的光譜已不再是光源的光譜,它出現(xiàn)了幾條暗線,即光源發(fā)射光譜中某些波長(zhǎng)的光因溶液吸收而消失,這種被溶液吸收后的光譜稱為該溶液的吸收光譜。
不同物質(zhì)的吸收光譜是不同的.因此根據(jù)吸收光譜,可以鑒別溶液中所含的物質(zhì)。
當(dāng)光線通過(guò)某種物質(zhì)的溶液時(shí)透過(guò)的光的強(qiáng)度減弱,因?yàn)橛幸徊糠止庠谌芤旱谋砻娣瓷浠蚍稚ⅲ徊糠止獗唤M成此溶液的物質(zhì)所吸收只有一部分光可透過(guò)溶液。
入射光= 反射光 + 分散光 + 吸收光 + 透過(guò)光。
如果我們用蒸餾水(或組成此溶液的溶劑)作為"空白"去校正反射,分散等因素造成的入射光的損失則:
入射光 = 吸收光 十 透過(guò)光
二、紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)
(一)什么是紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)
紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)是分光可見(jiàn)光度計(jì)的一種。是一種利用物質(zhì)對(duì)光的吸收性原理而設(shè)計(jì)制作的一種分析儀器,常用來(lái)進(jìn)行定性分析、純度檢查、結(jié)構(gòu)分析、絡(luò)合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測(cè)定、反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研究等。根據(jù)所測(cè)定波長(zhǎng)的范圍,分光光度計(jì)可分為紫外分光光度計(jì)、可見(jiàn)光分光光度計(jì)和紅外分光光度計(jì)等幾種。
紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)是基于紫外可見(jiàn)分光光度法原理,利用物質(zhì)分子對(duì)紫外可見(jiàn)光譜區(qū)的輻射吸收來(lái)進(jìn)行分析的一種分析儀器。主要由光源、單色器、吸收池、檢測(cè)器和信號(hào)處理器等部件組成。光源的功能是提供足夠強(qiáng)度的、穩(wěn)定的連續(xù)光譜。紫外光區(qū)通常用氫燈或氘燈.見(jiàn)光區(qū)通常用鎢燈或鹵鎢燈。單色器的功能是將光源發(fā)出的復(fù)合光分解并從中分出所需波長(zhǎng)的單色光。色散元件有棱鏡和光柵兩種。可見(jiàn)光區(qū)的測(cè)量用玻璃吸收池,紫外光區(qū)的測(cè)量須用石英吸收池。檢測(cè)器的功能是通過(guò)光電轉(zhuǎn)換元件檢測(cè)透過(guò)光的強(qiáng)度,將光信號(hào)轉(zhuǎn)變成電信號(hào)。常用的光電轉(zhuǎn)換元件有光電管、光電倍增管及光二極管陣列檢測(cè)器。分光光度計(jì)的分類方法有多種:按光路系統(tǒng)可分為單光束和雙光束分光光度計(jì);按測(cè)量方式可分為單波長(zhǎng)和雙波長(zhǎng)分光光度計(jì);按繪制光譜圖的檢測(cè)方式分為分光掃描檢測(cè)與二極管陣列全譜檢測(cè)。
(二)紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)儀器使用流程
1. 使用具有接地功能的電源,接通紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)電源
2. 打開(kāi)開(kāi)關(guān)預(yù)熱20分鐘左右,等待儀器完成自檢。
3. 設(shè)置測(cè)試方式:透光率、吸光度、濃度數(shù)據(jù)、波長(zhǎng)等。
4. 放置樣品:打開(kāi)樣品室蓋,在1~4號(hào)放置比色皿槽中,依次放入校具、參比液、樣品液1和樣品液2;
5. 校具校"0.000":將校具置入光路,在T方式下按"%T"鍵,此時(shí)儀器自動(dòng)校正后顯示"0.000";
6. 參比液校"100"%T或"0.000"A:將參比液拉入光路中,按"0A/100%T"鍵調(diào)0A/100%T,此時(shí)儀器顯示"BLA",表示儀器正在自動(dòng)校正,校正完畢后顯示"100"%T或"0.000"A后,表示校正完畢,可以進(jìn)行樣品測(cè)定.
7. 樣品測(cè)定:將兩樣品液分別拉入光路中,此時(shí)若在"T"方式下則可依次顯示樣品的透射比(透光度)若在"A"方式下,則顯示測(cè)得的樣品吸光度。
8. 使用完畢關(guān)上電源。清潔比色皿。
以上便是此次小編帶來(lái)的分光光度計(jì)相關(guān)內(nèi)容,通過(guò)本文,希望大家對(duì)分光光度計(jì)具備一定的了解。如果你喜歡本文,不妨持續(xù)關(guān)注我們網(wǎng)站哦,小編將于后期帶來(lái)更多精彩內(nèi)容。最后,十分感謝大家的閱讀,have a nice day!
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