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發(fā)布日期:2022-10-09 點(diǎn)擊率:74
定量分析和定性分析是分光光度計(jì)的兩大主要功能,特別是定量分析。其它的分析都應(yīng)該是從這兩大種功能中發(fā)展出來(lái)的。下面來(lái)詳細(xì)介紹介紹:
(1)定量分析
根據(jù)瑯伯-比爾定律,樣品的濃度和吸光度是成正比關(guān)系的,濃度越大,吸收值越高,所以分光光度計(jì)用的最多的還是定量分析,定量分析的種類(lèi)有很多,這里介紹常用的幾種定量分析方法:
A、絕對(duì)法:絕對(duì)法是紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)諸多分析方法中使用最多的一種方法。這是一種以瑯伯-比爾定律A=εbC為基礎(chǔ)的分析方法,某一物質(zhì)在一定波長(zhǎng)下ε值是一個(gè)常數(shù),石英比色皿的光程是已知的,也是一個(gè)常數(shù)。因此,可用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)在λmax波長(zhǎng)處,測(cè)定樣品溶液的吸光度值A(chǔ)。然后,根據(jù)瑯伯比爾定律求出C=A/εb,則可求出該樣品溶液的含量或濃度。
B、標(biāo)準(zhǔn)法:在選定的波長(zhǎng)處,在相同的測(cè)試條件下,分別測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)樣品溶液C標(biāo)和被測(cè)試樣品溶液C樣的吸光度A標(biāo)和A樣。然后,按下式求得樣品溶液的濃度或含量。
C樣=A樣/A標(biāo)×C標(biāo)
C、標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法
紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)最常用的定量分析方法是標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法。即先用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)配制一定濃度的溶液,再將該溶液配制成一系列的標(biāo)準(zhǔn)溶液。在一定波長(zhǎng)下,測(cè)試每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度,以吸光度值為縱坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)溶液對(duì)應(yīng)得濃度為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。最后,將樣品溶液按標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)繪制程序測(cè)得吸光度值,在標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)上查出樣品溶液對(duì)應(yīng)的濃度或含量。
A、其它分析方法
除上述幾個(gè)分析方法外經(jīng)常使用的分析方法外,還有比吸收系數(shù)法、最小二乘法、解聯(lián)立方程法和示差分光光度法。
(2)定性分析
如果未知物的紫外吸收光譜的最大吸收峰波長(zhǎng)λmax、最小吸收峰波長(zhǎng)λmin、最大摩爾吸光系數(shù)εmax,以及吸收峰的數(shù)目、位置、拐點(diǎn)與標(biāo)準(zhǔn)光譜數(shù)據(jù)完全一致,就可以認(rèn)為是同一種化合物。定性分析的主要目的是知道分析樣品中是什么物質(zhì)。
標(biāo)簽: 分光光度計(jì)
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